抗體亞型鑒定

抗體，稱為免疫球蛋白，通常是“Y”形，它們是由b細胞分泌的分子?？贵w是由兩條相同的重鏈（H）和輕鏈（L）通過二硫鍵組裝的四肽鏈結(jié)構(gòu)。每條鏈具有恒定區(qū)（C）和可變區(qū)（V）。根據(jù)抗體輕鏈C區(qū)氨基酸組成和排列的不同，可將其分為κ和λ兩型?？贵w的V區(qū)又可以細分為CDR(互補決定區(qū))和FR(骨架區(qū))?；阢q鏈區(qū)的大小，鏈間二硫鍵的位置和分子量的不同，抗體可以進一步細分為四種亞型。鼠源IgG可以分為IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3。在雜交瘤單抗制備完成后，可以進行抗體亞型鑒定。

服務(wù)內(nèi)容

  • 客戶提供：雜交瘤細胞上清；腹水；純化單抗
  • 鑒定范圍：IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3及IgM，IgA，κ，λ
  • 項目周期：1周

亞型鑒定實驗流程

抗體亞型鑒定

    ①：酶標(biāo)板預(yù)先包被了針對小鼠IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3及IgM，IgA，κ，λ的特異性抗體；
    ②：將待測樣品處理后加入到酶標(biāo)板中；
    ③：加入熒光標(biāo)記抗體孵育；
    ④：孵育一段時間后，顯色液顯色，判斷抗體類型。

抗體亞型鑒定意義

不同亞型抗體在抗體結(jié)構(gòu)（例如Fc區(qū)結(jié)構(gòu)、是否以多聚體形式存在等）及功能上（例如補體激活、半衰期等）有所區(qū)別，進行抗體亞型鑒定能夠更加清楚的了解手中抗體的結(jié)構(gòu)及功能，從而更好的應(yīng)用于下游實驗。

IgG抗體亞型間的比較

對比項目 IgG1(γ1) IgG2(γ2) IgG3(γ3) IgG4(γ4)
分子量（kDa） 150 150 170 150
氨基酸隱藏區(qū)域 15 12 62 12
H鏈間二硫鍵 2 4 11 2
半衰期（天） 14-21 14-21 7 14-21
平均成人血清含量（g/L） 6.98 3.8 0.51 0.56
相對豐度（%） 60 32 4 4

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