抗體標(biāo)記

銘研生物以客戶至上為原則，提供抗體相關(guān)領(lǐng)域的解決思路與方案。涉及領(lǐng)域包括上游的抗體發(fā)現(xiàn)、抗體測序和抗體工程，到下游應(yīng)用階段的大規(guī)?？贵w表達(dá)、抗體分析和抗體標(biāo)記。作為下游應(yīng)用的重要一環(huán)，抗體標(biāo)記對于基于免疫的測定是必需的（如Western blot，ELISA，流式細(xì)胞術(shù)，免疫組化和免疫熒光），也可用于從復(fù)雜的蛋白混合物中分離和純化某個目標(biāo)蛋白。抗體標(biāo)記物包括小分子、酶蛋白、熒光染料和放射性同位素等。這些標(biāo)記物各有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)根據(jù)不同的需求應(yīng)用于不同的實(shí)驗(yàn)。我們可以在抗體生產(chǎn)的基礎(chǔ)上為您提供生物素標(biāo)記，HRP，F(xiàn)ITC,同位素標(biāo)記服務(wù)。更多詳情，請聯(lián)系我們。

?  生物素標(biāo)記

生物素（Biotin）是一種小分子（244.3 Da），也被稱為維生素H，廣泛分布于動植物組織中。生物素作為最常見的抗體標(biāo)記物之一，源于抗生物素蛋白或鏈霉抗生物素蛋白對其表現(xiàn)出強(qiáng)大的親和力，這是自然界已知的最強(qiáng)非共價相互作用之一。需要注意的是，在檢測的過程中，生物素只用作固定連接，而不用作信號檢測。用生物素標(biāo)記蛋白質(zhì)或抗體的過程一般也稱之為生物素化（Biotinylation）。

生物素的小分子量是它的優(yōu)勢，能夠與抗體反應(yīng)快速而高效，且不易被外界環(huán)境影響（包括試劑濃度，PH環(huán)境，和蛋白變性劑等有機(jī)溶劑）。更重要的是，由于其較小的尺寸，生物素不會影響抗體的生物活性。而且，生物素與抗生物素蛋白的高特異性也可以在實(shí)際應(yīng)用中可最大限度地降低反應(yīng)試劑的非特異作用。
銘研提供兩種生物素化標(biāo)記方案，一是酶標(biāo)記法，另一種是傳統(tǒng)的化學(xué)標(biāo)記法。更多詳情，請直接與我們聯(lián)系。

?  HRP標(biāo)記

辣根過氧化物酶（HRP）， 是一種糖蛋白，分子量約為44 KDa。其廣泛分布于植物界，在辣根中含量高而得名。不同的底物在HRP的氧化能力下，直接產(chǎn)生顏色變化、化學(xué)發(fā)光或熒光信號，這使得HRP成為基于抗體-抗原檢測分析領(lǐng)域中最常用的酶標(biāo)記之一。廣泛應(yīng)用于Western blot, ELISA, and 免疫組化等。

HRP與抗體偶聯(lián)有兩種常見方法。一是戊二醛法，利用戊二醛的兩個醛基與HRP和抗體上的氨基結(jié)合，形成HRP-戊二醛-抗體結(jié)合物。另一種方法是簡易過碘酸鈉標(biāo)記法，是利用碘酸鹽氧化HRP的糖化部分形成醛基，再通過醛基與抗體分子的氨基結(jié)合，形成HRP標(biāo)記抗體。

?  FITC熒光素標(biāo)記

常見的熒光標(biāo)記物異硫氰酸熒光素（Fluorescein isothiocyanate, FITC），其異硫氰酸酯（Isothiocyanate）可與蛋白質(zhì)或抗體的伯胺基團(tuán)反應(yīng)，從而應(yīng)用于標(biāo)記抗體。一個抗體分子上可以同時標(biāo)記15-20個FITC分子，并不干擾與抗原結(jié)合的能力。FITC的熒光性質(zhì)包括在約495nm處的吸光度最大值和520nm的發(fā)射波長，可以應(yīng)用于熒光顯微鏡、熒光分光光度計(jì)或流式細(xì)胞儀等定性、定位或定量檢測。
熒光素（Fluorescein）能在光的照射下，吸收光能進(jìn)入激發(fā)態(tài)，當(dāng)反回基態(tài)時，以電磁輻射的形式放出所吸收的光能，從而產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象。熒光檢測相較于上述的標(biāo)記物，能夠更加準(zhǔn)確、特異、靈敏、快速地檢測出微量及超微量的抗原物質(zhì)。想了解或選擇其他熒光素衍生物？馬上咨詢！

?  同位素標(biāo)記

同位素是特定化學(xué)元素的變體，其質(zhì)子和電子數(shù)目不變，中子數(shù)有所不同。同位素標(biāo)記在生物學(xué)領(lǐng)域可以提供生物大分子的結(jié)構(gòu)位點(diǎn)的特異性研究，使分子易于通過質(zhì)譜和核磁共振檢測，被同位素均勻標(biāo)記的抗體等蛋白質(zhì)樣品可以提供豐富的結(jié)構(gòu)信息。此外，用細(xì)胞培養(yǎng)物中的氨基酸穩(wěn)定同位素標(biāo)記中，穩(wěn)定同位素用于定量蛋白質(zhì)。

同位素標(biāo)記有很多優(yōu)點(diǎn)，例如可以保持目標(biāo)分子的物理化學(xué)性質(zhì)，并且具有成本效益且易于使用。常見的同位素標(biāo)記物有²H、¹³C和¹⁵N等。標(biāo)記的化合物如¹³C標(biāo)記的葡萄糖或甘油和¹⁵N標(biāo)記的氯化銨或氯酸銨可以容易地?fù)饺肷L培養(yǎng)基中用于抗體等蛋白質(zhì)表達(dá)。通過工程菌或細(xì)胞體內(nèi)的酶途徑轉(zhuǎn)化為氨基酸中可預(yù)測的位置，最終表達(dá)出標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)。